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据称，游戏中将有31个角色（包括正派和反派），其中有些角色在电影中没有出现过，但在其他地方可以看到（信息较为可信），目前已经确认并公布了10个角色。
这10个角色是：
正派角色：
蝙蝠侠 Batman
警长戈登 James Gordon
戈登警长的女儿芭芭拉·戈登（作为Oracle）
反派角色：
小丑 Joker
鳄鱼人 Killer Croc
小丑女 Harley Quinn
班恩 Bane
Mr. Zsasz
毒藤女 Poison Ivy
稻草人 Scarecrow（不会在故事模式中出现，但会在他的挑战地图中亮相，并且需要在gamestop预订才能获得）
未确认但可能会出现的角色
The Riddler谜语人
Tweedledum和Tweedledee, 企鹅Penguin
冷却人 Mr. Freeze
沉默 Hush
Amygdala
双面人Two-Face
猫女Catwoman
Maxie Zeus, Hugo Strange, 飞火狂Firefly
Killer Moth, 捕鼠人Ratcatcher
忍者大师Ra's al Ghul
黑脸Black Mask
Humpty Dumpty
大白鲨Great White Shark
泥人Clayface
Mad Hatter
Calendar Man 和 Ventriloquist 腹语人
{网站名称}的《蝙蝠侠：阿卡姆疯人院》游戏专题页面链接是：https://www.3dmgame.com/games/585-1.htm
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